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结肠癌耐药细胞株的培养方法分享给大家
更新时间:2021-05-26 点击次数:1610次
  由于结肠癌耐药细胞株在长期的保存传代过程中,受到各种不稳定因素影响。例如细胞遗传污染和基因变异等。故经过一段时间之后,肿瘤细胞的遗传物质可能发生变异,并导致其生物学特性的改变,从而降低肿瘤动物模型的均一性和可比对性。因此要想保证肿瘤动物模型的稳定性,必须对结肠癌耐药细胞株进行质量监控。
 
  肿瘤细胞实质就是肿瘤。肿瘤组织由实质和间质两部分构成,肿瘤实质是肿瘤细胞,是肿瘤的主要成分,具有组织来源特异性。它决定肿瘤的生物学特点以及每种肿瘤的特殊性。通常根据肿瘤的实质形态来识别各种肿瘤的组织来源,进行肿瘤的分类、命名、和组织学诊断,并根据其分化成熟程度和异型性大小来确定肿瘤的良恶性和肿瘤的恶性程度。肿瘤细胞有三个显著的基本特征即:不死性,迁移性和失去接触抑制。除此之外,肿瘤细胞还有许多不同于正常细胞的生理、生化和形态特征。
 
  结肠癌耐药细胞株培养:
 
  1.取出小鼠后沥干酒精,放入超净台内,固定在泡沫板上。
 
  2.用镊子提起皮肤,用解剖剪剪开皮肤一个横切口,将皮肤向上撕开,然后剪开肌肉等,暴露出腹腔,在左侧找到脾脏,用弯头眼科镊取出脾脏,置于无菌培养皿中。
 
  3.用生理盐水将取出的脾脏清洗多次,并剔除多余无用的组织。
 
  4.将筛网置于平皿中,脾脏置于筛网上,用弯头镊镊住,轻轻在筛网上进行碾磨,同时不停滴加不含血清的培养液冲洗。
 
  5.将碾磨好的细胞悬液吸入至离心管中,离心(1000rpm,5min),吸去上清(去除血液等)。
 
  6.加入10ml培养液,吹打混匀,取样计数。
 
  7.将稀释好的细胞悬液分装于培养瓶中,轻轻摇晃混匀,在培养瓶上。
 
  结肠癌耐药细胞株复苏步骤:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
 
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